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IBA新品 | 简单快捷高纯度的外泌体提取策略,助力外泌体研究
人阅读 发布时间:2020-05-12 23:52
德国IBA Lifesciences 近期全新推出了Fab-TACS外泌体分离纯化重力柱,利用了免疫亲和层析的原理,可以从多种样品类型中快速分离得到高纯度,未标记的外泌体,从而实现纯化流程简便,高质量的外泌体分离,为外泌体研究添砖加瓦。
细胞外囊泡(EXTRACELLULAR VESICLES,EVS)
外泌体(Exosomes)膜性囊泡结构,内吞起源,可以被不同种类的细胞分泌,参与多种生理学和/或病理学反应。其直径在30-150nm之间,是最小的细胞外囊泡。外泌体含有的表面蛋白部分源自于在胞吞过程中的细胞质膜,所特有的四跨膜蛋白超家族中的蛋白被认为是外泌体的标志蛋白,如CD9, CD63和CD81。通过运输特定的生物分子,如DNA,RNA,蛋白质,酶和脂质,外泌体成为了介导细胞间通讯的全新载体。这种通过细胞间囊泡运输进行快速精准的通讯,在人类健康与疾病,包含发育,免疫,组织稳态,癌症,和神经退行性疾病中,发挥着重要作用。由于外泌体的的体积很小,又与其他细胞外囊泡,如凋亡小体(100-5000nm)或微泡(100-1000nm)部分重叠,因此,外泌体的提取仍具挑战。目前使用的提取方法有差速离心法,排阻色谱法,超滤法,PEG沉淀法等。当分离不同来源的外泌体时,方法往往受到提取效率,纯化步骤与时间,回收率等方面的限制。到目前为止,表面标记特异性磁珠分离法已经发展的相对完善,但由于与磁珠结合的不可逆性,会损伤外泌体的完整性。相较而言,使用Fab-TACS外泌体分离技术则可以从多种样品类型中快速分离得到高纯度,未标记的外泌体。
亲和无踪分离
以Fab为基础的亲和无踪细胞分离技术(Fab-TACS),无需使用磁珠,即可利用亲和层析系统进行外泌体的分离。其原理是利用Twin-Strep-tag 标签的CD-特异性Fab 片段 (Fabs)进行可逆的结合和释放外泌体。样品的来源覆盖细胞培养上清,血清,和血浆,从其中可分离得到label-free, 且含有完整生物学功能的外泌体。从而实现纯化流程简便,高质量,且具高可重复性的外泌体分离纯化,为外泌体研究添砖加瓦.
创新的高质量外泌体提取技术:Fab-TACS
以Fab为基础的亲和无踪细胞分离技术(Fab-TACS),无需使用磁珠,利用亲和层析系统进行外泌体的分离。其原理是利用Twin-Strep-tag标签的CD-特异性Fab 片段 (Fabs)进行可逆的结合和释放外泌体。其优势在于:
1. 可从多种体液样品中获取高特异性,高纯度的外泌体,最小化杂质污染
2. 简易便捷的纯化流程,无需使用磁珠,超离心机,以及其他额外设备
3. 分离试剂可逆,不影响外泌体的生物学活性和功能
一根重力柱,获得高纯度
从间充质干细胞(MSCs)培养上清中分离的到直径范围为30-150nm的颗粒,验证了外泌体的大量富集(A)。相较而言,使用其他商品化PEGylation试剂盒,提取出的的符合外泌体大小的颗粒仅为32%(B),其中混杂了其他较大的细胞外囊泡。如果分离得到的样品中有其他与外泌体相同大小的杂质,则会对纯度产生影响。使用免疫印迹法进行鉴定富集的标志蛋白:CD63和Alix。经检测,两种蛋白均富集在纯化得到的颗粒中(C),验证了分离到的颗粒为外泌体。由于细胞培养上清的组成可能由于MSC供体样本的不同而有所差异。因此取来自不同MSC供体样本进供体样本进行三次独立实验,纯化后的外泌体平均粒径再86nm至90nm之间。三次分离得到的颗粒中,有94%的颗粒直径30-150nm之间(D)。因此,Fab-TACS技术不仅可以分离得到高纯度的外泌体,还具有高度的重现性。
让外泌体分离纯化更加快捷简便!
Fab-TACS分离技术直接作用于表面标志蛋白,无需费时的离心和冗杂的样品制备步骤。实验方法简便快捷,可以有效地提取出高质量的外泌体,有助于刚接触此领域的研究人员使用。渐变的方法将外泌体分离时间缩短至30分钟。
试剂盒组分
产品目录
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Contact
官网:www.iba-lifesciences.com
Email: info.cn@iba-lifesciences.com
微信:IBA_Lifesciences
细胞外囊泡(EXTRACELLULAR VESICLES,EVS)
外泌体(Exosomes)膜性囊泡结构,内吞起源,可以被不同种类的细胞分泌,参与多种生理学和/或病理学反应。其直径在30-150nm之间,是最小的细胞外囊泡。外泌体含有的表面蛋白部分源自于在胞吞过程中的细胞质膜,所特有的四跨膜蛋白超家族中的蛋白被认为是外泌体的标志蛋白,如CD9, CD63和CD81。通过运输特定的生物分子,如DNA,RNA,蛋白质,酶和脂质,外泌体成为了介导细胞间通讯的全新载体。这种通过细胞间囊泡运输进行快速精准的通讯,在人类健康与疾病,包含发育,免疫,组织稳态,癌症,和神经退行性疾病中,发挥着重要作用。由于外泌体的的体积很小,又与其他细胞外囊泡,如凋亡小体(100-5000nm)或微泡(100-1000nm)部分重叠,因此,外泌体的提取仍具挑战。目前使用的提取方法有差速离心法,排阻色谱法,超滤法,PEG沉淀法等。当分离不同来源的外泌体时,方法往往受到提取效率,纯化步骤与时间,回收率等方面的限制。到目前为止,表面标记特异性磁珠分离法已经发展的相对完善,但由于与磁珠结合的不可逆性,会损伤外泌体的完整性。相较而言,使用Fab-TACS外泌体分离技术则可以从多种样品类型中快速分离得到高纯度,未标记的外泌体。
亲和无踪分离
以Fab为基础的亲和无踪细胞分离技术(Fab-TACS),无需使用磁珠,即可利用亲和层析系统进行外泌体的分离。其原理是利用Twin-Strep-tag 标签的CD-特异性Fab 片段 (Fabs)进行可逆的结合和释放外泌体。样品的来源覆盖细胞培养上清,血清,和血浆,从其中可分离得到label-free, 且含有完整生物学功能的外泌体。从而实现纯化流程简便,高质量,且具高可重复性的外泌体分离纯化,为外泌体研究添砖加瓦.
创新的高质量外泌体提取技术:Fab-TACS
以Fab为基础的亲和无踪细胞分离技术(Fab-TACS),无需使用磁珠,利用亲和层析系统进行外泌体的分离。其原理是利用Twin-Strep-tag标签的CD-特异性Fab 片段 (Fabs)进行可逆的结合和释放外泌体。其优势在于:
1. 可从多种体液样品中获取高特异性,高纯度的外泌体,最小化杂质污染
2. 简易便捷的纯化流程,无需使用磁珠,超离心机,以及其他额外设备
3. 分离试剂可逆,不影响外泌体的生物学活性和功能
一根重力柱,获得高纯度
从间充质干细胞(MSCs)培养上清中分离的到直径范围为30-150nm的颗粒,验证了外泌体的大量富集(A)。相较而言,使用其他商品化PEGylation试剂盒,提取出的的符合外泌体大小的颗粒仅为32%(B),其中混杂了其他较大的细胞外囊泡。如果分离得到的样品中有其他与外泌体相同大小的杂质,则会对纯度产生影响。使用免疫印迹法进行鉴定富集的标志蛋白:CD63和Alix。经检测,两种蛋白均富集在纯化得到的颗粒中(C),验证了分离到的颗粒为外泌体。由于细胞培养上清的组成可能由于MSC供体样本的不同而有所差异。因此取来自不同MSC供体样本进供体样本进行三次独立实验,纯化后的外泌体平均粒径再86nm至90nm之间。三次分离得到的颗粒中,有94%的颗粒直径30-150nm之间(D)。因此,Fab-TACS技术不仅可以分离得到高纯度的外泌体,还具有高度的重现性。
让外泌体分离纯化更加快捷简便!
Fab-TACS分离技术直接作用于表面标志蛋白,无需费时的离心和冗杂的样品制备步骤。实验方法简便快捷,可以有效地提取出高质量的外泌体,有助于刚接触此领域的研究人员使用。渐变的方法将外泌体分离时间缩短至30分钟。
试剂盒组分
试剂盒组分 | 4x Kit | 10x Kit |
Fab-TACS Gravity Column | 4 | 10 |
Fab-Strep | 4 | 10 |
Biotin stock solution | 1 | 2 |
Fab-TACS Gravity Adapter | 1 | 2 |
产品目录
Fab | 品名 | 规格 | 货号 |
人CD9 | CD9 Fab-TACS Exosome Isolation Kit | 4x columns 10x columns | 6-3219-004 6-3219-010 |
人CD81 | CD81 Fab-TACS Exosome Isolation Kit | 4x columns 10x columns | 6-3281-004 6-3281-010 |
人CD9 | CD9 Fab-TACS Exosome Iso- lation Introductory Kit | 2x columns | 6-3296-002 |
人CD81 | CD81 Fab-TACS Exosome Isolation Introductory Kit | 2x columns | 6-3297-002 |
人CD9/ 人CD81 |
CD9/CD81 Fab-TACS Exosome Isolation Starter Kit |
4x columns | 6-3295-004 |
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官网:www.iba-lifesciences.com
Email: info.cn@iba-lifesciences.com
微信:IBA_Lifesciences