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IBA lifesciences公司总部位於德国,致力於生命科学之研究,以提供高质量的产品及服务为使命。二十年来,以杰出的专利技术Strep-tag®系统为基础,IBA发展出完整的产品组合,涵盖重组蛋白的表达丶纯化与固定以及特定细胞从全血或相关体液中分离的技术,广泛的被应用於学术及商业研究机构中。至今在美国已设置了配送中心,而全球有超过40家的代理商,客户遍布全世界。同时,我们也是全球领先的核酸合成专家,在DNA及RNA寡核苷酸的合成上已有超过二十年的经验,尤其能根据客户的选择,生产含有特定染料或化学修饰的特殊寡核苷酸。知名的Strep-tag®/Strep-Tactin®产品系列,适合用来纯化高纯度及高活性的蛋白质。而最新的突破性产品-更具亲和力但仍具可逆性的Strep-Tactin® XT-更进一步的扩展了Strep-tag®的应用领域,例如检测蛋白质相互作用或需要更稳定蛋白质链结的检测。另一专利科技—Streptamer® 技术,则被应用在磁性或非磁性细胞分离法上,其试剂的可逆性使分离後的细胞保有完整的功能及活性。另一应用则是结合此系列中含萤光染料的产品,将功能性免疫细胞染色。IBA的核酸合成部门则根据客户的要求,提供个别的订制服务,合成萤光标记或其他特殊标记的DNA或RNA寡核苷酸。近年来日趋热门的适体技术(Aptamer),亦是我们的专业核酸合成服务重点之一。IBA lifesciences是生命科学领域的杰出供应商,我们的产品组合提供了研究人员在各种不同领域里的解决方案。专业的产品开发部门及技术支援服务让我们能与客户紧密合作,促进生命科学研究的发展。更详细的产品信息,欢迎参观我们的官网www.iba-lifesciences.com。
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    原女士

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    细胞库 / 细胞培养、试剂、实验室仪器 / 设备、技术服务

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IBA新品 | 简单快捷高纯度的外泌体提取策略,助力外泌体研究

人阅读 发布时间:2020-05-12 23:52

德国IBA Lifesciences 近期全新推出了Fab-TACS外泌体分离纯化重力柱,利用了免疫亲和层析的原理,可以从多种样品类型中快速分离得到高纯度,未标记的外泌体,从而实现纯化流程简便,高质量的外泌体分离,为外泌体研究添砖加瓦。


细胞外囊泡(
EXTRACELLULAR VESICLES,EVS)


外泌体(Exosomes)膜性囊泡结构,内吞起源,可以被不同种类的细胞分泌,参与多种生理学和/或病理学反应。其直径在30-150nm之间,是最小的细胞外囊泡。外泌体含有的表面蛋白部分源自于在胞吞过程中的细胞质膜,所特有的四跨膜蛋白超家族中的蛋白被认为是外泌体的标志蛋白,如CD9, CD63和CD81。通过运输特定的生物分子,如DNA,RNA,蛋白质,酶和脂质,外泌体成为了介导细胞间通讯的全新载体。这种通过细胞间囊泡运输进行快速精准的通讯,在人类健康与疾病,包含发育,免疫,组织稳态,癌症,和神经退行性疾病中,发挥着重要作用。由于外泌体的的体积很小,又与其他细胞外囊泡,如凋亡小体(100-5000nm)或微泡(100-1000nm)部分重叠,因此,外泌体的提取仍具挑战。目前使用的提取方法有差速离心法,排阻色谱法,超滤法,PEG沉淀法等。当分离不同来源的外泌体时,方法往往受到提取效率,纯化步骤与时间,回收率等方面的限制。到目前为止,表面标记特异性磁珠分离法已经发展的相对完善,但由于与磁珠结合的不可逆性,会损伤外泌体的完整性。相较而言,使用Fab-TACS外泌体分离技术则可以从多种样品类型中快速分离得到高纯度,未标记的外泌体。



亲和无踪分离


Fab为基础的亲和无踪细胞分离技术(Fab-TACS),无需使用磁珠,即可利用亲和层析系统进行外泌体的分离。其原理是利用Twin-Strep-tag 标签的CD-特异性Fab 片段 (Fabs)进行可逆的结合和释放外泌体。样品的来源覆盖细胞培养上清,血清,和血浆,从其中可分离得到label-free, 且含有完整生物学功能的外泌体。从而实现纯化流程简便,高质量,且具高可重复性的外泌体分离纯化,为外泌体研究添砖加瓦.




创新的高质量外泌体提取技术:Fab-TACS


Fab为基础的亲和无踪细胞分离技术(Fab-TACS),无需使用磁珠,利用亲和层析系统进行外泌体的分离。其原理是利用Twin-Strep-tag标签的CD-特异性Fab 片段 (Fabs)进行可逆的结合和释放外泌体。其优势在于:
1. 可从多种体液样品中获取高特异性,高纯度的外泌体,最小化杂质污染
2. 简易便捷的纯化流程,无需使用磁珠,超离心机,以及其他额外设备
3. 分离试剂可逆,不影响外泌体的生物学活性和功能




一根重力柱,获得高纯度

从间充质干细胞(MSCs)培养上清中分离的到直径范围为30-150nm的颗粒,验证了外泌体的大量富集(A)。相较而言,使用其他商品化PEGylation试剂盒,提取出的的符合外泌体大小的颗粒仅为32%(B),其中混杂了其他较大的细胞外囊泡。如果分离得到的样品中有其他与外泌体相同大小的杂质,则会对纯度产生影响。使用免疫印迹法进行鉴定富集的标志蛋白:CD63和Alix。经检测,两种蛋白均富集在纯化得到的颗粒中(C),验证了分离到的颗粒为外泌体。由于细胞培养上清的组成可能由于MSC供体样本的不同而有所差异。因此取来自不同MSC供体样本进供体样本进行三次独立实验,纯化后的外泌体平均粒径再86nm至90nm之间。三次分离得到的颗粒中,有94%的颗粒直径30-150nm之间(D)。因此,Fab-TACS技术不仅可以分离得到高纯度的外泌体,还具有高度的重现性。



让外泌体分离纯化更加快捷简便!

Fab-TACS分离技术直接作用于表面标志蛋白,无需费时的离心和冗杂的样品制备步骤。实验方法简便快捷,可以有效地提取出高质量的外泌体,有助于刚接触此领域的研究人员使用。渐变的方法将外泌体分离时间缩短至30分钟。

试剂盒组分
试剂盒组分 4x Kit 10x Kit
Fab-TACS Gravity Column 4 10
Fab-Strep 4 10
Biotin stock solution 1 2
Fab-TACS Gravity Adapter 1 2

产品目录

 
Fab 品名 规格 货号
CD9 CD9 Fab-TACS Exosome Isolation Kit 4x columns 10x columns 6-3219-004
6-3219-010
CD81 CD81 Fab-TACS Exosome Isolation Kit 4x columns 10x columns 6-3281-004
6-3281-010
CD9 CD9 Fab-TACS Exosome Iso- lation Introductory Kit 2x columns 6-3296-002
CD81 CD81 Fab-TACS Exosome Isolation Introductory Kit 2x columns 6-3297-002
CD9/
CD81
CD9/CD81 Fab-TACS
Exosome Isolation Starter Kit
4x columns 6-3295-004

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官网:www.iba-lifesciences.com
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